小布Tips|钙离子指示剂选择&使用小贴士

时间:2021-09-25 14:02

神经系统研究实验中,常常使用钙离子成像技术Calcium imaging)。这种利用钙离子指示剂检测组织内钙离子浓度的方法,能够提示神经元活动。

但是,“如何选择合适的钙离子指示剂”,“如何监测钙信号”,可能还困惑着各位老师。

 

没有关系,小布今天为各位老师详细解读!

跟着小布记住这些关键小Tips吧!

 

 

#What | 钙离子成像技术的原理是什么?

属于光遗传学技术中的一类,实际检测的是细胞或组织中Ca2+的浓度变化,将其转化为荧光信号,从而使细胞电活动转化为可记录的光信号。检测的手段是利用可以感应Ca2+的浓度的钙离子指示剂完成的。

 

 

#Which | 在哪些实验中使用钙离子成像技术?

如果您的实验需要:

1)记录神经元活动(包括树突和树突棘)

2)检测特定类型细胞或亚细胞结构内的信号变化

3)研究神经网络控制的动物行为

4)研究疾病发生发展机制

5)研究机体发育过程和内在机制

6)分析细胞间相互作用

7)药物筛选和药效学考察

 

 

#How | 钙离子指示剂该如何选择?

常用的遗传编码钙离子指示剂(GECIs)可分为GCaMP6系列jGCaMP7系列、GCaMP-X系列、CaMPARI、XCaMP系列等。

 

那么怎么选择合适的GECIs?

 

在GCaMP6系列中:

GCaMP6s具有高敏感性,适合低频信号的指示;

GCaMp6m结合活性适中,适用的范围最广;

GCaMp6f快速动力学曲线,解离最快,适合高频信号的指示。

 

在jGCaMP7系列中:

jGCaMP7s具有高敏感,灵敏性可达GCaMP6s的5倍以上;

jGCaMP7f快速动力学,其反应速度是GCaMP6s的3倍,GCaMp6f的5倍,适用于更强的检测单动作电位反应或群体活动实验;

jGCaMP7b具有较亮的基线荧光,灵敏性是GCaMP6s的3倍。适用检测神经元突起或神经纤维;

jGCaMP7c本底荧光低,对比度高,信号清晰,灵敏性是GCaMP6s的2.7倍,适用于大范围成像。

 

其他GECIs的区分如下表:

图片

 

当然,如果上述描述还不能解答您的疑惑,还可以联系小布获取更有针对性的解答哦~

 

 

#How | 钙信号怎么记录和监测?

有三种常用的体内钙信号记录方式:

图片

 

 

#Example | 实例展示

图片

AML 患者原生血样中的钙成像

(DOI:10.1038/cddiscovery.2016.10)

 

 

悄悄告诉各位老师,

上述提及的产品和实验外包服务,

小布都可以完成哦~!

 

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时间:2021-09-25 14:02来源:未知 作者:admin8 点击: