时间：2021-02-19 10:44
#什么是基因过表达？
基因过表达（gene overexpression）是将目的基因CDS克隆到相应的质粒或病毒载体上，利用载体骨架上构建的调控元件，使基因可以在人为控制的条件下实现大量转录和翻译，从而实现目的基因的过表达。
#基因过表达有哪些应用？
#有哪些类型的过表达？
1. 常规蛋白表达
常规的蛋白表达的同时可以为蛋白表达添加融合或非融合的荧光标签，亲和标签，亚细胞定位系列等一系列修饰。
2. 非编码RNA表达
与常规蛋白表达不同的是，由于非编码RNA（链接非编码RNA介绍）仅仅转录但不翻译，无蛋白产生，因此此类表达载体（尤其是lncRNA）最好独立表达荧光蛋白，且常规蛋白表达的修饰基本不能使用。目前常见的非编码RNA主要为microRNA、lncRNA、circRNA三大类表达载体与之对应。
3. 毒性蛋白表达
细胞毒性蛋白表达与常规蛋白表达的载体除少量修饰外并无在明显区别，但在AAV载体制备过程中对表达的毒蛋白进行抑制才能产生。此载体主要用于过表达各种对细胞有毒害的蛋白。
#可以选择的调控元件有哪些？
#如何定制您的AAV过表达载体？
#实例
通过对MEN1缺陷小鼠注射AAV病毒（AAV2-CamKII-p35-T2A-GFP-WPRE）恢复p35的表达，发现增加了神经元树突的复杂性。
载体结构分析：CamKII启动子+ p35基因+自剪切2A肽+非融合GFP绿色荧光标签
对MEN1缺陷小鼠注射AAV2-过表达p35病毒可恢复p35的表达（Zhuang, K., Cell reports, 2018）
神经科学研究就找布林凯斯！
您科研路上的好帮手~
本文未经授权禁止转载
如有需要，可联系小编获取原文
