时间:2021-09-25 14:02
神经系统研究实验中,常常使用钙离子成像技术(Calcium imaging)。这种利用钙离子指示剂检测组织内钙离子浓度的方法,能够提示神经元活动。
但是,“如何选择合适的钙离子指示剂”,“如何监测钙信号”,可能还困惑着各位老师。
没有关系,小布今天为各位老师详细解读!
跟着小布记住这些关键小Tips吧!
#What | 钙离子成像技术的原理是什么?
属于光遗传学技术中的一类,实际检测的是细胞或组织中Ca2+的浓度变化,将其转化为荧光信号,从而使细胞电活动转化为可记录的光信号。检测的手段是利用可以感应Ca2+的浓度的钙离子指示剂完成的。
#Which | 在哪些实验中使用钙离子成像技术?
如果您的实验需要:
1)记录神经元活动(包括树突和树突棘)
2)检测特定类型细胞或亚细胞结构内的信号变化
3)研究神经网络控制的动物行为
4)研究疾病发生发展机制
5)研究机体发育过程和内在机制
6)分析细胞间相互作用
7)药物筛选和药效学考察
#How | 钙离子指示剂该如何选择?
常用的遗传编码钙离子指示剂(GECIs)可分为GCaMP6系列、jGCaMP7系列、GCaMP-X系列、CaMPARI、XCaMP系列等。
那么怎么选择合适的GECIs?
在GCaMP6系列中:
GCaMP6s具有高敏感性,适合低频信号的指示;
GCaMp6m结合活性适中,适用的范围最广;
GCaMp6f快速动力学曲线,解离最快,适合高频信号的指示。
在jGCaMP7系列中:
jGCaMP7s具有高敏感,灵敏性可达GCaMP6s的5倍以上;
jGCaMP7f快速动力学,其反应速度是GCaMP6s的3倍,GCaMp6f的5倍,适用于更强的检测单动作电位反应或群体活动实验;
jGCaMP7b具有较亮的基线荧光,灵敏性是GCaMP6s的3倍。适用检测神经元突起或神经纤维;
jGCaMP7c本底荧光低,对比度高,信号清晰,灵敏性是GCaMP6s的2.7倍,适用于大范围成像。
其他GECIs的区分如下表:
当然,如果上述描述还不能解答您的疑惑,还可以联系小布获取更有针对性的解答哦~
#How | 钙信号怎么记录和监测?
有三种常用的体内钙信号记录方式:
#Example | 实例展示
AML 患者原生血样中的钙成像
(DOI:10.1038/cddiscovery.2016.10)
悄悄告诉各位老师,
上述提及的产品和实验外包服务,
小布都可以完成哦~!
本文未经授权禁止转载
如有需要,可联系小编获取原文