小布Tips｜外周—中枢神经环路标记整体服务

心脏——中枢（心血管疾病）

使用病毒：PRV-CAG-EGFP

注射位点：心脏

实验动物：雄性SD大鼠

实验方法与结果：在大鼠心室心肌的顶端注射PRV-CAG-EGFP，表达5天后，与心肌、SCG、PVN和SCN区域均观察到PRV标记的神经元。表明心脏接受来自SCN多突触神经输入，昼夜节律主起搏器SCN与心脏之间存在解剖联系，即SCN-PVN-SCG-心脏的交感神经轴。

(Yuhong Wang, Front Cardiovasc Med, 2021 )

 

肝脏——中枢（代谢相关研究）

使用病毒：PRV-GFP

注射位点：肝脏

实验动物：C57Bl6小鼠

实验方法与结果：将PRV-GFP注射至小鼠肝左叶后, 表达不同时间时（3-8d），发现五个感染阶段的代表性区域，I期，脊髓中GFP表达；II期，包括脑干背侧运动10N、PVH和下丘脑旁核(PSTh)中GFP表达；III期，包括NTS、LH和腹侧被盖区(VTA)中GFP表达；IV期，包括后区(AP)、A5区和杏仁核中央核(Ce)中GFP表达；V期，皮层M1区出现GFP免疫荧光。表明了PRV-GFP注射入肝脏后主要感染部位。

(Sarah Stanley, Proc Natl Acad Sci USA, 2010)

 

胰腺——中枢（糖尿病）

使用病毒：PRV-BaBlu

注射位点：胰腺

实验动物：MIP-Cre^ERT小鼠

实验方法与结果：与小鼠胰腺中注射PRV-BaBlu，注射96h后，β-Gal在PVN、ARC、VMN、DMN、CeA和LHA脑区中进一步富集，脑区可能与胰腺交流相关。大脑其他部位和胰腺附近组织中均未检测到β-Gal。

(Wilfredo Rosario, Diabetes, 2016)

 

膀胱——中枢（膀胱过度活跃综合症）

使用病毒：PRV-EGFP、PRV-RFP

注射位点：膀胱壁

实验动物：C57BL/6小鼠

实验方法与结果：将PRV-EGFP注射到小鼠膀胱壁后，在皮层S1/M1L5锥体神经元观察到EGFP信号。分别将PRV-EGFP与PRV-RFP注射到小鼠右侧和左侧膀胱壁，在皮层S1/M1L5锥体神经元观察到EGFP和RFP共同表达。表明PRV-EGFP、PRV-RFP无差别逆行跨多级到皮层S1/M1L5锥体神经元，皮层S1/M1L5锥体神经元为支配膀胱壁的上游脑神经元群。

 

(Jiwei Yao, Nat Neurosci, 2018)

 

性腺——中枢（性相关疾病）

使用病毒：PRV

注射位点：睾丸

实验动物：雄性SD大鼠

实验方法与结果：与睾丸处注射PRV，5天后在前脑区CeA、PVN处均观察到其免疫荧光，同时检测PRV标记的细胞中CRF/TH阳性和阴性的细胞占比，为进一步研究脑—睾丸通路调节机制。

(P James, J Neuroendocrinol, 2008)

 

脾脏——中枢（免疫方向研究）

使用病毒：PRV-CMV-mRFP 或PRV-CMV-GFP

注射位点：脾脏

实验动物：B6小鼠

实验方法与结果：通过脾脏注射表达荧光蛋白的重组伪狂犬病病毒(PRV) 进行逆行追踪，注射96小时之后，从脾脏至脊髓、脑干和下丘脑均检测到荧光信号。表明脾脏处接受来自中枢神经系统 PSth、SubC、NTS、VLM、 LPGi区域的跨多级神经元输入。
 

(Xu Zhang, Nature, 2020)

耳蜗——中枢（听觉方向研究）

使用病毒：PRV-EGFP

注射位点：耳蜗

实验动物：豚鼠

实验方法与结果：耳蜗注射PRV后，在上橄榄复合体中发现标记神经元。在橄榄外侧上叶(LSO)中发现PRV标记的小尺寸神经元，其边缘有少量较大尺寸的神经元，这些神经元被归为LOC神经元；在梯形体的腹侧核(VNTB)中也发现PRV标记的MOC神经元。表明PRV标记并识别耳蜗神经元的输入信号。

 

(M Christian Brown, J Assoc Res Otolaryngol, 2013)

以上是小布总结的外周--中枢环路相关实例。

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