小布tips | 外周PRV示踪-快，准，亮！你想要的都在这！

随着PRV病毒在中枢神经环路和外周器官中枢调控网络研究领域的广泛应用，布林凯斯在PRV生产和使用等方面积累了丰富经验。目前PRV在中枢神经系统环路示踪研究中的使用趋于成熟，但是在外周脏器的中枢调控网络解析中，一直存在示踪效果不佳的情况，例如示踪结果不稳定、荧光信号弱，标记效率低等。

详见往期推文：小布tips | 外周——中枢神经环路标记整体服务

下面，小布就以我们公司PRV在中枢标记及外周不同部位的注射测试结果为实例，分享一些PRV使用tips。

1、中枢网络示踪

产品：BC-PRV-724；

剂量：100 nl；

表达时间：3天。

2、某内脏器官的神经调控网络示踪

产品：BC-PRV-531-Plus；

剂量：3 ul；

表达时间：4-5天。

3、某腺体的神经调控网络示踪

产品：BC-PRV-531-Pro；

剂量：3 ul；

表达时间：4-5天。

Notes：

1. 由于PRV病毒对动物机体有一定的毒性作用，建议选择成年且健康状况良好的动物开展实验，以便更高效地完成相关示踪研究。

2. 注射PRV病毒之后，大约3-5天左右小鼠会出现相应的症状，应定期监测小鼠状态，当出现蜷缩不动、抽搐、颤抖等症状时可进行灌流取材，濒死状态取材时PRV感染效果最佳。

3. 注射PRV病毒之后，小鼠出现症状的时间窗不易掌控，建议从注射后第3天增加监测小鼠的频率；

4. PRV为逆向跨多突触病毒，动物实验时，可根据环路连接级数设定不同的取材时间。根据病毒生活周期推测其在中枢内的传播速度可能为24-36h，跨一级突触；36-48h跨两级突触；60-72h跨三级突触或更多，所以应根据实验需求合理安排取样时间。

5 活体实验中，若因表达时间较短等原因造成荧光信号较弱的情况，可通过免疫组化实验放大荧光信号。

参考文献

1. Pickard G E，Smeraski C A，Tomlinson CC，Banfield B W，Kaufman J，Wilcox C L，Enquist

L W，Sollars P J.J.Neurosci.，2002，22: 2701-2710

2. Banfield B W，Kaufman J D，Randall J A，Pickard G E．J．Virol．，2003，77: 10106-10112

3. Jia F，Lv P，Miao H，Shi X，Mei H，Li L，Xu X，Tao S，Xu F．Front．Neuroanat.，2019，13: 63
 

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